脂肪因子实验

酶联免疫吸附实验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。基本原理：它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于订量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。测量时，抗原（抗体）先结合在固相载体上，但仍保留其免疫活性，然后加一种抗体（抗原）与酶结合成的偶联物（标记物），此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性，当偶联物与固相载体上的抗原（抗体）反应结合后，再加上酶的相应底物，即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原（抗体）含量成正比。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察，也可以用分光光度计（酶标仪）加以测定。其方法简单，方便迅速，特异性强。Luminex既能检测蛋白，又能检测核酸。脂肪因子实验

酶联免疫斑点技术（Elispot）LabEx始终致力于为您的研究需要，提供前沿的多因子技术平台，用心服务，现有囊括基因、蛋白、组织、细胞水平包括PCRArray、ELISA，MSD、Luminex、CBA，抗体芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12个专业的实验室技术平台，助推科研进步！随着酶免疫分析技术在医学及生物学领域的较广的应用，使体外检测各种细胞因子和抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时，以往人们常用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体，但由于游离的循环抗体或CK半衰期不同，使之在体液中不断地被代谢，而不能确切地反应体内抗体及CK水平。80年代中期等根据ELISA技术的基本原理，建立了体外检测特异性抗体分泌细胞和CK分泌细胞的固相酶联免疫斑点(ELISPOT)技术，因其具有较高的特异性和敏感性，目前正被国内外较广的应用，对探索自身免疫系统疾病发病机制具有重要意义。脂肪因子CBA，细胞因子微球检测技术，是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法。

问：因子检测技术有哪些？答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问：多因子实验适用的样本类型有哪些？答:Serum（血清）、Plasma（血浆）、Cell/Tissuelysate（细胞/组织裂解液）、CerebrospinalFluid（脑脊液）、BronchoalveolarLavageFluid（支气管肺泡灌洗液）、NasalLavage（鼻腔灌洗液）Fluid、PeritonealFluid（腹腔液）等等。问：如何计算96孔板可做多少样本？答:标曲16孔，预实验8孔，剩余72孔，单孔可做72样本，复孔可做36样本；问：多因子实验的正式实验，是否可以分批次检测？答:可以，但是有如下要注意：（1）CBA：试剂盒须在一个月内用完，否则标准曲线要重做，重做就要用到试剂，那样本就样减少。（2）Luminex：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂也要在一个月内用完，防止试剂过期。（3）MSD：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂在一个月内用完，防止试剂过期，每次送样+标准曲线的数量，比较好是4的倍数，否则会造成浪费。

免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些？1)、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误。不知抗体是进口的还是国产的工作液，怎么这么高稀释度也没能做出阳性结果？另外，不是抗体浓度越高就越易出现阳性结果，抗原抗体反应有前带和后带效应，必须摸索比较好浓度。2)、抗原修复不全，对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位，以利于与抗体结合；建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验，这是比较好的时间和次数。若不行，还可高压修复。3)、组织切片本身这种抗原含量低；4)、血清封闭时间过长。5)、DAB孵育时间过短。6)、细胞通透不全，抗体未能充分进入胞内参与反应。7)、开始做免疫组化，我建议你一定要首先做个阳性对照片，排除抗体等外的方法问题。LabEx提供抗体蛋白质芯片,sengenics服务！

抗体芯片实验室服务思考留给科研，实验外包出去！抗体芯片是蛋白芯片的一种，具有微型化、集成化、高通量化的特点，可以用于检测某一特定的生理或病理过程相关蛋白的表达丰度，目前主要用于信号转异、蛋白质组学、肿块物及其他疾病的相关研究。抗体芯片检测的样本类型包括提取物、细胞培养上清、血清血浆等，检测的方式通过生物素标记的方法完成样本标记，然后芯片孵育，样本中相关蛋白与芯片上特异性抗体结合，通过荧光的方式使用芯片扫描仪检测。实验获得的数据将通过标准的数据处理流程进行分析。抗体芯片检测的优点：灵敏度高、特异性好、重复性佳、准确性高抗体芯片的检测内容包括：抗体芯片主要用于蛋白表达谱、蛋白质磷酸化及蛋白质相互作用等检测多因子实验的正式实验，可以分批次检测。脂肪因子

LabEx多因子检测技术（包括luminex、MSD等），所需样本量少，检测指标丰富。脂肪因子实验

基于luminex平台的xMAP技术：Luminex：应用荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，不同的微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。原理：应用微球和流式细胞仪的原理，微球内部含有三种免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此，利用微球技术，可以同时检测高达500个蛋白或基因。特点：1、既能检测蛋白，又能检测核酸2、既能用于临床，又能用于多学科科研领域3、真正意义的“高通量”检测，一次检测100个指标4、在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平脂肪因子实验

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